Study in effects of 1, 25-dihydroxyvitamin D3 on apoptosis and autophagy of colon cancer cells and its mechanism
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摘要:目的 观察1，25-二羟维生素D3[1，25-（OH）2D3]对人结肠癌HCT-116细胞凋亡和自噬的影响并初步探讨其机制。方法 体外培养人结肠癌细胞HCT-116，分成对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和联合组[1，25-（OH）2D3高剂量联合腺苷单磷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂]共5组，观察并比较各组细胞凋亡和自噬情况。结果 低剂量组、中剂量组、高剂量组的HCT-116细胞凋亡程度、自噬程度及cleaved Caspase3、cleaved Caspase8、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK蛋白表达水平高于对照组，p-mTOR蛋白表达水平低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。联合组的HCT-116细胞凋亡程度、自噬程度及cleaved Caspase3、cleaved Caspase8、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK蛋白表达水平低于高剂量组，p-mTOR蛋白表达水平高于高剂量组，差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 1，25-（OH）2D3可通过调控AMPK/mTOR信号通路增强结肠癌细胞凋亡和自噬，发挥抗肿瘤作用。
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关键词:
- 1, 25-二羟维生素D3 /
- 结肠癌 /
- 细胞凋亡 /
- 自噬 /
- AMPK/mTOR信号通路
Abstract:Objective To observe the effects of 1, 25 dihydroxyvitamin D3[1, 25-(OH)2D3] on apoptosis and autophagy of human colon cancer HCT116 cells and explore its mechanism.Methods HCT-116 cells were cultured in vitro and divided into control group, low-dose group, medium-dose group, high-dose group and combined group[high-dose 1, 25-(OH)2D3 combined with adenosine monophosphate activated protein kinase (AMPK) inhibitor]. Apoptosis and autophagy were observed and compared in each group.Results The degrees of apoptosis and autophagy, the expression levels of cleaved Caspase 3, cleaved Caspase 8, LC3Ⅱ/LC3Ⅰ, Beclin-1 and p-AMPK proteins in HCT-116 cells in low-dose group, medium-dose group and high-dose group were significantly higher, and the expression level of p-mTOR protein was significantly lower compared with those in the control group (P < 0.05). The degrees of apoptosis and autophagy, the expression levels of cleaved Caspase 3, cleaved Caspase 8, LC3Ⅱ/LC3Ⅰ, Beclin-1 and p-AMPK proteins in HCT-116 cells in the combined group were significantly lower, while the expression level of p-mTOR protein was significantly higher compared with those in the high-dose group (P < 0.05).Conclusion 1, 25-(OH)2D3 can enhance apoptosis and autophagy of colon cancer cells by regulating AMPK/mTOR signaling pathway thereby playing anti-tumor roles.-
Keywords:
- 1, 25-dihydroxyvitamin D3 /
- colon cancer /
- apoptosis /
- autophagy /
- AMPK/mTOR signaling pathway
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结肠癌是一种普遍存在于发达国家和发展中国家的常见恶性肿瘤，在全世界与癌症相关的死亡原因中排名第2位，占所有癌症的10%~15%[1]。细胞凋亡是对抗癌症的重要防御机制，可导致潜在的有害细胞死亡[2]。自噬可能在癌症的发生和进展中发挥不同的作用，同时也可能在肿瘤生长的不同阶段促进或抑制细胞增殖[3-4]。在应激反应中，自噬调节是由激酶介导的，如哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)[5]。WEI Q等[6]研究发现，山楂酸可通过AMPK/mTOR信号通路抑制结肠肿瘤的发生。1, 25-二羟维生素D3[1, 25-(OH)2D3]作为一种多效激素，除具有对钙和磷酸盐代谢以及骨骼生物学的经典调节作用外，还具有抗增殖、促凋亡和促分化等作用，这些作用表明1, 25-(OH)2D3具有显著的抗癌活性[7-9]。相关研究[10]发现, 1, 25-(OH)2D3对结肠癌有保护作用，但其作用机制尚不明确。本研究以HCT-116人结肠癌细胞为模型，观察1, 25-(OH)2D3对细胞凋亡和自噬的影响，并通过AMPK/mTOR通路探究其作用机制，现报告如下。
1. 材料与方法
1.1 主要材料
人结肠癌细胞HCT-116购自中国科学院细胞库。1, 25-(OH)2D3, 货号705942, 购自美国Sigma公司。Dorsomorphin(AMPK抑制剂)，货号ab120843, 购自美国Abcam公司。Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒，序号G003-1-2, 购自南京建成生物工程研究所。cleaved Caspase 3一抗(货号9664), cleaved Caspase 8一抗(货号8592), LC3A/B一抗(货号12741), Beclin-1一抗(货号3495), mTOR一抗(货号2983), p-mTOR一抗(货号5536), 辣根过氧化物酶(HRP)标记山羊抗小鼠IgG二抗(货号7074), 均购自美国Cell Signaling Technology公司。AMPK一抗，货号MA5-15815; p-AMPK一抗，货号44-1150G, 购自美国Thermo Fisher Science公司。
1.2 实验仪器
二氧化碳细胞培养箱购自美国Thermo Fisher Scientific公司，流式细胞仪(ZS-AE7S)购自中生(苏州)医疗科技有限公司，凝胶成像仪购自美国Bio-Rad公司。
1.3 实验方法
1.3.1 细胞培养
人结肠癌细胞HCT-116用含有10%胎牛血清和青链霉素(100 U/mL)的RPMI-1640培养基培养，置于37 ℃、5%CO2的培养箱中。将细胞培养至生长对数期用于后续实验。
1.3.2 分组及给药
经前期预实验筛选1, 25-(OH)2D3对HCT-116细胞的处理浓度，分为5组，即对照组(正常培养基培养)、低剂量组[1, 25-(OH)2D3 10 nmol/L]、中剂量组[1, 25-(OH)2D3 100 nmol/L]、高剂量组[1, 25-(OH)2D3 1 000 nmol/L]和联合组[1, 25-(OH)2D3 1 000 nmol/L加AMPK抑制剂Dorsomorphin 10 μmol/L]。
1.3.3 流式细胞仪检测细胞凋亡情况
将生长对数期的HCT-116细胞(1×106个/mL)取1 mL接种于6孔板中，于37 ℃孵育24 h。不同组别采用相应浓度的1, 25-(OH)2D3和Dorsomorphin处理，再连续培养48 h，收集细胞，采用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒的方案进行检测。应用流式细胞仪检测细胞，以FlowJo软件分析数据。
1.3.4 透射电镜观察细胞自噬情况
根据1.3.3方法处理细胞，收集药物处理后的细胞，胰蛋白酶处理，用2.5%磷酸盐缓冲的戊二醛固定30 min, 再固定在1%四氧化锇中。将细胞包埋、切片，用乙酸铀酰和柠檬酸铅双重染色，并应用JEM-1200EX透射电子显微镜进行观察。
1.3.5 Western blot(WB)分析凋亡相关蛋白、自噬相关蛋白和AMPK/mTOR通路相关蛋白
根据1.3.3方法处理细胞，用预冷的PBS洗涤经药物处理后的HCT-116细胞，收集细胞，加入细胞裂解液，提取总蛋白，以BCA法检测蛋白浓度。SDS-PAGE电泳分离蛋白，转膜，加一抗(Caspase 3、Caspase 8、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK、AMPK、mTOR、p-mTOR，稀释比例为1∶1 000), 4 ℃孵育过夜，洗膜加二抗，在37 ℃条件下孵育1 h, 曝光显色。以β-actin为内参蛋白，分析各蛋白的相对表达量。
1.4 统计学分析
本研究所得数据均采用SPSS 22.0软件进行统计学分析，计量资料以(x±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK-q检验, P < 0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 1, 25-(OH)2D3对HCT-116细胞凋亡的影响
低剂量组、中剂量组、高剂量组的HCT-116细胞凋亡率均高于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05); 联合组的HCT-116细胞凋亡率低于高剂量组，差异有统计学意义(P < 0.05)。联合组的HCT-116细胞凋亡率与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见图 1、表 1。
表 1 各组HCT-116细胞凋亡情况比较(x±s)组别 n 细胞凋亡率/% 对照组 6 4.63±1.08 低剂量组 6 15.03±1.17* 中剂量组 6 21.42±1.26*# 高剂量组 6 27.18±1.19*#△ 联合组 6 6.23±1.04▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。2.2 1, 25-(OH)2D3对HCT-116细胞自噬情况的影响
与对照组相比，低剂量组、中剂量组、高剂量组存在更高水平的自噬; 与高剂量组相比，联合组的HCT-116细胞自噬程度降低。见图 2。
2.3 1, 25-(OH)2D3对HCT-116细胞凋亡相关蛋白表达的影响
低剂量组、中剂量组、高剂量组的cleaved Caspase3、cleaved Caspase8蛋白表达水平高于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05); 联合组的cleaved Caspase3、cleaved Caspase8蛋白表达水平低于高剂量组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见图 3、表 2。
表 2 各组HCT-116细胞凋亡相关蛋白表达情况比较(x±s)组别 n cleaved Caspase3/
β-actincleaved Caspase8/
β-actin对照组 6 0.21±0.07 0.16±0.08 低剂量组 6 0.46±0.10* 0.39±0.13* 中剂量组 6 0.77±0.12*# 0.75±0.14*# 高剂量组 6 0.98±0.14*#△ 0.97±0.11*#△ 联合组 6 0.23±0.08▲ 0.19±0.07▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。2.4 1, 25-(OH)2D3对HCT-116细胞自噬相关蛋白表达的影响
低剂量组、中剂量组、高剂量组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平高于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05); 联合组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平低于高剂量组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见图 4、表 3。
表 3 各组HCT-116细胞自噬相关蛋白表达情况比较(x±s)组别 n LC3Ⅱ/LC3Ⅰ Beclin-1/β-actin 对照组 6 0.34±0.08 0.15±0.06 低剂量组 6 0.56±0.07* 0.33±0.10* 中剂量组 6 0.82±0.11*# 0.86±0.15*# 高剂量组 6 1.01±0.15*#△ 1.12±0.14*#△ 联合组 6 0.42±0.06▲ 0.42±0.09▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。2.5 1, 25-(OH)2D3对HCT-116细胞AMPK/mTOR通路相关蛋白表达的影响
低剂量组、中剂量组、高剂量组的p-AMPK/AMPK蛋白水平高于对照组, p-mTOR/mTOR蛋白水平低于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05); 联合组的p-AMPK/AMPK蛋白水平低于高剂量组, p-mTOR/mTOR蛋白水平高于高剂量组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见图 5、表 4。
表 4 各组HCT-116细胞AMPK/mTOR通路相关蛋白表达情况比较(x±s)组别 n p-AMPK/AMPK p-mTOR/mTOR 对照组 6 0.26±0.08 0.96±0.15 低剂量组 6 0.46±0.10* 0.70±0.12* 中剂量组 6 0.67±0.11*# 0.51±0.09*# 高剂量组 6 0.98±0.14*#△ 0.31±0.08*#△ 联合组 6 0.31±0.07▲ 0.86±0.11▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。3. 讨论
结肠癌是世界范围内最常见的消化系统恶性肿瘤，临床常选择手术、放疗、化疗等方法治疗结肠癌[11]。尽管结肠癌的治疗已经取得进展，但结肠癌的复发率和病死率仍然很高。1, 25-(OH)2D3是具有强大抗癌活性的激素，具有广泛的抗肿瘤谱[12]。近年来，学者们对1, 25-(OH)2D3在肿瘤中的作用机制开展了大量研究，并揭示了其作用的一些潜在分子机制，本研究则观察了1, 25-(OH)2D3对人结肠癌HCT-116细胞凋亡和自噬的影响并初步探讨其机制。
细胞凋亡又称程序性细胞死亡，是细胞维持生命活动的重要过程[13]。细胞凋亡被认为是有效的抗癌治疗方案的关键。1, 25-(OH)2D3可上调p53并调节其下游线粒体介导的凋亡途径，发挥抑制人肝癌细胞增殖和诱导其凋亡的作用[14]。LEE J等[15]研究发现，1, 25-(OH)2D3可通过上调FOXO3抑制肾癌细胞的肿瘤活性，促进细胞凋亡。Caspase家族是哺乳动物中程序性细胞死亡的“发起者”和“执行者”。Caspase启动子首先被凋亡信号激活，然后激活下游级联的Caspase效应分子; 细胞中的一系列底物被特异性地水解，最后导致细胞解体。Caspase-3是其中最重要的凋亡效应分子，其位于每个凋亡信号传导途径的中心。Caspase-3激活后，细胞死亡是不可避免的[16-17]。本研究WB结果显示, 1, 25-(OH)2D3处理显著上调cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-8表达，诱导HCT-116细胞凋亡，这与Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术结果一致，表明1, 25-(OH)2D3可刺激Caspase-3、Caspase-8蛋白激活，增强结肠癌HCT-116细胞凋亡。
自噬是一个关键的细胞过程，通常保护细胞和生物体免受营养缺乏等应激源的影响，除了在正常生理过程中的作用外，还在癌症等病理过程中发挥重要作用。相关研究[18]发现，自噬可抑制肿瘤生长，自噬基因的缺失会导致肿瘤发生。Beclin-1最初被鉴定为肿瘤抑制基因，是凋亡和自噬之间的关键分子之一，可通过促进细胞自噬来抑制肿瘤[19]。当自噬过程开始时, LC3Ⅰ(16 kDa)被转换为LC3Ⅱ(14 kDa), 通过检测LC3Ⅱ、LC3Ⅰ水平获得LC3Ⅱ/LC3Ⅰ, 可反映自噬水平[20]。本研究透射电镜结果证实, 1, 25-(OH)2D3处理可诱导细胞发生自噬特征的改变。WB结果显示, 1, 25-(OH)2D3可上调Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达，表明1, 25-(OH)2D3可增强HCT-116细胞自噬诱导。
AMPK作为一种能量传感器，具有调节细胞代谢和稳态、促进自噬等功能，而mTOR为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，可调节细胞生长、增殖、运动和生存，是自噬的抑制剂[5]。AMPK/mTOR作为与细胞自噬相关的信号传导途径，与肿瘤抑制作用密切相关。WANG F等[21]研究发现，通过激活AMPK-mTOR-ULK1轴增强自噬，天然植物提取物10-羟基喜树碱可促进人膀胱癌细胞凋亡。百里香亦可通过AMPK/mTOR信号通路诱导自噬，抑制肾癌细胞的转移[22]。本研究结果发现, HCT-116细胞经1, 25-(OH)2D3处理后, AMPK磷酸化水平升高, mTOR磷酸化水平降低，表明1, 25-(OH)2D3可促进AMPK蛋白激活，抑制mTOR蛋白激活。此外，在AMPK抑制剂的作用下, 1, 25-(OH)2D3诱导的结肠癌细胞凋亡和自噬作用减弱，表明1, 25-(OH)2D3通过调控AMPK/mTOR信号通路改变结肠癌细胞凋亡和自噬。
综上所述, 1, 25-(OH)2D3可通过调控AMPK/mTOR信号通路增强结肠癌细胞凋亡和自噬，发挥抗肿瘤作用。然而，结肠癌细胞的自噬过程比较复杂，仍有很多作用机制尚未阐明，未来还需进一步深入研究。
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表 1 各组HCT-116细胞凋亡情况比较(x±s)
组别 n 细胞凋亡率/% 对照组 6 4.63±1.08 低剂量组 6 15.03±1.17* 中剂量组 6 21.42±1.26*# 高剂量组 6 27.18±1.19*#△ 联合组 6 6.23±1.04▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。
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表 2 各组HCT-116细胞凋亡相关蛋白表达情况比较(x±s)
组别 n cleaved Caspase3/
β-actincleaved Caspase8/
β-actin对照组 6 0.21±0.07 0.16±0.08 低剂量组 6 0.46±0.10* 0.39±0.13* 中剂量组 6 0.77±0.12*# 0.75±0.14*# 高剂量组 6 0.98±0.14*#△ 0.97±0.11*#△ 联合组 6 0.23±0.08▲ 0.19±0.07▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。
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表 3 各组HCT-116细胞自噬相关蛋白表达情况比较(x±s)
组别 n LC3Ⅱ/LC3Ⅰ Beclin-1/β-actin 对照组 6 0.34±0.08 0.15±0.06 低剂量组 6 0.56±0.07* 0.33±0.10* 中剂量组 6 0.82±0.11*# 0.86±0.15*# 高剂量组 6 1.01±0.15*#△ 1.12±0.14*#△ 联合组 6 0.42±0.06▲ 0.42±0.09▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。
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表 4 各组HCT-116细胞AMPK/mTOR通路相关蛋白表达情况比较(x±s)
组别 n p-AMPK/AMPK p-mTOR/mTOR 对照组 6 0.26±0.08 0.96±0.15 低剂量组 6 0.46±0.10* 0.70±0.12* 中剂量组 6 0.67±0.11*# 0.51±0.09*# 高剂量组 6 0.98±0.14*#△ 0.31±0.08*#△ 联合组 6 0.31±0.07▲ 0.86±0.11▲ 与对照组比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05;
与中剂量组比较, △P < 0.05; 与高剂量组比较, ▲P < 0.05。
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[1] WEN J, MIN X, SHEN M, et al. ACLY facilitates colon cancer cell metastasis by CTNNB1[J]. J Exp Clin Cancer Res, 2019, 38(1): 401-413. doi: 10.1186/s13046-019-1391-9
[2] ZHOU P, WANG C, HU Z, et al. Genistein induces apoptosis of colon cancer cells by reversal of epithelial-to-mesenchymal via a Notch1/NF-κB/slug/E-cadherin pathway[J]. BMC Cancer, 2017, 17(1): 813-823. doi: 10.1186/s12885-017-3829-9
[3] KOCATURK N M, AKKOC Y, KIG C, et al. Autophagy as a molecular target for cancer treatment[J]. Eur J Pharm Sci, 2019, 134: 116-137.
[4] AMARAVADI R K, KIMMELMAN A C, DEBNATH J. Targeting autophagy in cancer: recent advances and future directions[J]. Cancer Discov, 2019, 9(9): 1167-1181. doi: 10.1158/2159-8290.CD-19-0292
[5] ZHAO W, ZHANG L, CHEN R, et al. SIRT3 protects against acute kidney injury via AMPK/mTOR-regulated autophagy[J]. Front Physiol, 2018, 9(1): 1526-1536. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30487750
[6] WEI Q, ZHANG B, LI P, et al. Maslinic acid inhibits colon tumorigenesis by the AMPK-mTOR signaling pathway[J]. J Agric Food Chem, 2019, 67(15): 4259-4272. doi: 10.1021/acs.jafc.9b00170
[7] CAI L J, LUO L F, TANG Z M, et al. Combined antitumor effects of 1, 25? dihydroxy vitamin D3 and Notch inhibitor in liver cancer[J]. Oncol Rep, 2018, 40(3): 1515-1524. http://www.ingentaconnect.com/content/sp/or/2018/00000040/00000003/art00031
[8] LI B, LV L, LI W. 1, 25-Dihydroxy vitamin D3 inhibits the Ras-MEK-ERK pathway and regulates proliferation and apoptosis of papillary thyroid carcinoma[J]. Steroids, 2020, 159(1): 108585-108612. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0039128X20300106
[9] SUN H Y, JIANG C W, CONG L L, et al. CYP24A1 inhibition facilitates the antiproliferative effect of 1, 25(OH)2D3 through downregulation of the WNT/β-catenin pathway and methylation-mediated regulation of CYP24A1 in colorectal cancer cells[J]. DNA Cell Biol, 2018, 37(9): 742-749. doi: 10.1089/dna.2017.4058
[10] FERRER-MAYORGA G, LARRIBA M J, CRESPO P, et al. Mechanisms of action of vitamin D in colon cancer[J]. J Steroid Biochem Mol Biol, 2019, 185: 1-6. doi: 10.1016/j.jsbmb.2018.07.002
[11] JIANG F, ZHOU J Y, ZHANG D, et al. Artesunate induces apoptosis and autophagy in HCT116 colon cancer cells, and autophagy inhibition enhances the artesunate induced apoptosis[J]. Int J Mol Med, 2018, 42(3): 1295-1304. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29901098/
[12] VANOIRBEEK E, KRISHNAN A, EELEN G, et al. The anti-cancer and anti-inflammatory actions of 1, 25(OH)2D3[J]. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab, 2011, 25(4): 593-604. doi: 10.1016/j.beem.2011.05.001
[13] D'ARCY M S. Cell death: a review of the major forms of apoptosis, necrosis and autophagy[J]. Cell Biol Int, 2019, 43(6): 582-592. doi: 10.1002/cbin.11137
[14] HUANG J, YANG G, HUANG Y, et al. 1, 25(OH)2D3 induced apoptosis of human hepatocellular carcinoma cells in vitro and inhibited their growth in a nude mouse xenograft model by regulating histone deacetylase 2[J]. Biochimie, 2018, 146: 28-34. doi: 10.1016/j.biochi.2017.11.012
[15] LEE J, PARK S H. Tumor-suppressive activity of 1, 25-dihydroxyvitamin D3 against kidney cancer cells via up-regulation of FOXO3[J]. Biosci Biotechnol Biochem, 2016, 80(10): 1947-1953. doi: 10.1080/09168451.2016.1184561
[16] XU X, LAI Y, HUA Z C. Apoptosis and apoptotic body: disease message and therapeutic target potentials[J]. Biosci Rep, 2019, 39(1): BSR20180992-BSR20181009. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30530866
[17] NAGATA S. Apoptosis and clearance of apoptotic cells[J]. Annu Rev Immunol, 2018, 36: 489-517. doi: 10.1146/annurev-immunol-042617-053010
[18] KIMMELMAN A C, WHITE E. Autophagy and tumor metabolism[J]. Cell Metab, 2017, 25(5): 1037-1043. doi: 10.1016/j.cmet.2017.04.004
[19] DING G B, SUN J, WU G, et al. Robust anticancer efficacy of a biologically synthesized tumor acidity-responsive and autophagy-inducing functional beclin 1[J]. ACS Appl Mater Interfaces, 2018, 10(6): 5227-5239. doi: 10.1021/acsami.7b17454
[20] CAO Y, LUO Y, ZOU J, et al. Autophagy and its role in gastric cancer[J]. Clin Chim Acta, 2019, 489: 10-20. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30472237
[21] WANG F, CAO M, FAN M, et al. AMPK-mTOR-ULK1 axis activation-dependent autophagy promotes hydroxycamptothecin-induced apoptosis in human bladder cancer cells[J]. J Cell Physiol, 2020, 235(5): 4302-4315. doi: 10.1002/jcp.29307
[22] ZHANG Y, FAN Y, HUANG S, et al. Thymoquinone inhibits the metastasis of renal cell cancer cells by inducing autophagy via AMPK/mTOR signaling pathway[J]. Cancer Sci, 2018, 109(12): 3865-3873. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30259603
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期刊类型引用(5)
1. 张玉. 1, 25-二羟维生素D_3在自身免疫性疾病中的研究进展. 中国城乡企业卫生. 2024(10): 23-25 . 
百度学术
2. 廖强明，鲍新民，王日玮，张开华，万焱华. 腹腔镜下完整结肠系膜切除术对近期肝肠循环和机体免疫的影响. 吉林医学. 2023(03): 663-666 . 百度学术
3. 熊华朝，严明权，肖炜明，张思琴. 线粒体自噬相关基因在胃腺癌中的差异表达与核心基因挖掘. 实用临床医药杂志. 2023(19): 1-6+11 . 本站查看
4. 贾丽媛，王丽，温丽，翟小颖，梁玉丽. 急性淋巴细胞白血病患儿血清25羟维生素D3、乳酸脱氢酶、白细胞介素-6水平与危险度分层和预后不良的关系研究. 现代生物医学进展. 2022(11): 2166-2170 . 百度学术
5. 杨邯平，刘冰，张慧英，王琳，刘国华. 瘦素联合脂联素在结直肠癌与结直肠腺瘤鉴别诊断中的应用价值. 实用临床医药杂志. 2022(21): 85-89 . 本站查看
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