Effects of electroacupuncture on hippocampal neuron autophagy and IGF-1/PI3K/Akt pathway in rats with hypoxic-ischemic brain damage
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摘要:目的
探讨电针对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠海马神经元自噬及胰岛素样生长因子1（IGF-1）/磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路的影响。
方法将108只新生大鼠随机分为假手术组、模型组、IGF-1组（0.2 mg/kg）、电针组、电针联合LY294002组（电针+PI3K抑制剂0.3 mg/kg），每组18只。采用左颈总动脉结扎和低氧处理2 h的方法构建新生大鼠HIBD模型（造模成功率为80%）。各组大鼠在手术清醒后和电针治疗结束后进行神经功能缺陷评分；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测脑组织IGF-1的含量；苏木精-伊红（HE）染色观察脑组织病理学变化；透射电镜观察细胞自噬情况；免疫荧光双标法检测自噬标志物与神经元特异性核蛋白（NeuN）的共定位表达；Western blot法检测海马组织PI3K/Akt通路、自噬相关蛋白的表达[PI3K、磷酸化PI3K（p-PI3K）、Akt、磷酸化p-Akt（p-Akt）、Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3-Ⅱ）、微管相关蛋白轻链3Ⅰ（LC3-Ⅰ）]。
结果与假手术组相比，HIBD模型组大鼠海马中神经元损伤加重，神经功能缺损评分、海马组织Beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达增加，脑组织IGF-1的含量以及海马组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的表达降低；与模型组相比，IGF-1组、电针组神经元损伤减轻，神经功能缺损评分、Beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬小体数量、LC3/NeuN共表达的神经元减少或降低，脑组织IGF-1的含量、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的表达升高；上述差异均有统计学意义（P<0.05）。LY294002能显著降低IGF-1的水平，减弱电针对海马组织IGF-1/PI3K/Akt通路的激活和海马神经元自噬的抑制作用。
结论电针可能通过激活IGF-1/PI3K/Akt通路，抑制海马神经元过度自噬，减轻新生大鼠HIBD。
Abstract:ObjectiveTo explore the effects of electroacupuncture on hippocampal neuron autophagy and insulin-like growth factor 1 (IGF-1)/phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt) pathway in neonatal rats with hypoxic-ischemic brain damage (HIBD).
MethodsA total of 108 neonatal rats were randomly divided into sham operation group, model group, IGF-1 group (0.2 mg/kg), electroacupuncture group, electroacupuncture combined with LY294002 group (electroacupuncture combined with 0.3 mg/kg PI3K inhibitor), with 18 rats in each group. HIBD model of neonatal rats was established by ligation of left common carotid artery and hypoxia treatment for 2 hours (the success rate of modeling was 80%). The rats in each group were scored for neurological deficits at being awake after the operation and after electroacupuncture treatment; ELISA was used to detect the content of IGF-1 in brain tissues; hematoxylin-eosin (HE) staining was used to observe the pathological change of brain tissues; transmission electron microscope was used to observe the cell autophagy; immunofluorescence double-labeling method was used to detect the colocalization expression of autophagy markers and neuron-specific nuclear protein (NeuN); western blot method was used to detect the expression of PI3K/Akt pathway and autophagy-related proteins in hippocampus[PI3K, phosphorylated PI3K (p-PI3K), Akt, phosphorylated Akt (p-Akt), Beclin-1, microtubule-related protein light chain 3Ⅱ (LC3-Ⅱ), and microtubule-related protein light chain 3Ⅰ (LC3-Ⅰ)].
ResultsCompared with the sham operation group, the neuron damage in the hippocampus of the HIBD model group was aggravated, the neurological deficit score, the Beclin-1 and LC3-Ⅱ/LC3-I expression in the hippocampus were increased, while the IGF-1 content in brain tissues, p-PI3K/PI3K and p-Akt/Akt expression in hippocampus were reduced; compared with the model group, the neuron damage in the IGF-1 group and the electroacupuncture group was alleviated, the neurological deficit score, Beclin-1 and LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ, the number of autophagosomes and the LC3/NeuN co-expressed neurons were decreased or reduced, while the IGF-1 content in brain tissues, p-PI3K/PI3K and p-Akt/Akt expression were increased; the differences mentioned above were statistically significant (P<0.05). LY294002 was able to significantly reduce the level of IGF-1, weaken the activation of the IGF-1/PI3K/Akt pathway of hippocampus and the inhibition of hippocampal neuron autophagy by electroacupuncture.
ConclusionElectroacupuncture may inhibit excessive autophagy of hippocampal neurons by activating the IGF-1/PI3K/Akt pathway, thereby alleviating HIBD in neonatal rats.
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肺癌是威胁人类生命安全的恶性肿瘤之一，其发病率与致死率均增长较快。目前，肺癌的联合治疗技术已取得巨大进步，但患者预后仍很差, 5年生存率较低[1-2]。中医药是肺癌患者良好的辅助治疗药物，治疗效果良好，且毒性较小[3-4]。左旋含羞草碱是从含羞草中提取的一种植物氨基酸，可抑制咽鳞状细胞癌细胞生长[5]。然而，左旋含羞草碱能否调控肺癌的发生与发展尚未明确。微小RNA(miRNA)约有22个核苷酸，主要通过对靶基因的翻译抑制及mRNA降解参与疾病的进展过程。研究[6]表明，微小RNA-1301-3p(miR-1301-3p)在肺癌组织和细胞中表达增加，下调miR-1301-3p能够抑制肺癌细胞生长及迁移。本研究探讨左旋含羞草碱对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能作用机制，现报告如下。
1. 材料与方法
1.1 材料与试剂
人正常肺上皮细胞BEAS-2B、人肺癌细胞A549均购自美国模式培养物集存库(ATCC); DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、二甲基亚砜、磷酸盐缓冲液、多聚甲醛、结晶紫、噻唑蓝(MTT)均由上海碧云天生物提供; Nanodrop2000c超微量分光光度计、细胞裂解液、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)试剂、96孔反转录仪器和96孔qRT-PCR仪器购自美国Thermo Fisher公司; 寡聚核苷酸包括anti-miR-NC、miR-1301-3p抑制剂、miR-NC、miR-1301-3p模拟物均由广州锐博生物合成; Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司; Transwell试验所用的小室以及Matrigel基质胶购自美国Corning公司; 一抗抗体和二抗抗体由美国Santa Cruz公司提供。
1.2 方法
1.2.1 实验分组
将A549细胞以4 000个/孔的密度培养于直径9.6 cm的有盖培养皿，随后向孔中加入含不同浓度(100、200、400 μmol/L)左旋含羞草碱的DMEM培养基培养24 h[7], 分别记为左旋含羞草碱低剂量组、左旋含羞草碱中剂量组、左旋含羞草碱高剂量组，另将正常培养的A549细胞记为对照组。为探讨miR-1301-3p对肺癌细胞生物学行为的影响，本研究采用脂质体转染法将miR-1301-3p抑制剂及其对照分别转染至培养的A549细胞，分别记为anti-miR-1301-3p组、anti-miR-NC组。为验证左旋含羞草碱是否可通过调控miR-1301-3p表达而影响肺癌细胞生物学行为，本研究采用脂质体转染法将miR-1301-3p模拟物及其对照分别转染至A549细胞，转染成功后将400 μmol/L左旋含羞草碱添加到每组并培养24 h, 分别记为左旋含羞草碱+miR-1301-3p组、左旋含羞草碱+miR-NC组。
1.2.2 MTT试验
一系列处理后，收集各组A549细胞以2 000个/孔的密度培养于96孔板。根据MTT试剂盒的说明书，向培养皿每孔中加入5 mg/mL MTT试剂20 μL, 并在培养箱中孵育4 h。向每孔加入150 μL二甲基亚砜，以溶解细胞中的甲瓒。随后，使用酶标仪检测样品在490 nm处的吸光度(A)值。最后，根据所测A值计算细胞增殖抑制率，公式为(对照组A-实验组A)/(对照组A-空白组A)×100%。
1.2.3 平板克隆形成实验
不同处理后，收集各组A549细胞以200个/孔的密度培养于12孔板，于5%二氧化碳的培养箱中培养14 d, 培养期间每3 d更换1次DMEM培养基。各组A549细胞用磷酸盐缓冲液洗之后，每孔加入多聚甲醛和1%结晶紫。观察细胞集落形成情况，计数细胞克隆形成数，单个集落的判断标准是细胞团直径大于1 mm, 当集落之间出现相互融合时结束计数。
1.2.4 划痕实验
铺板之前先用马克笔在6孔板背面笔直地画3条横线作为标记，经不同处理后，收集各组A549细胞以2×105个/孔的密度培养于6孔板，放置于5%二氧化碳的培养箱中培养至细胞长满。用20 μL枪头垂直于孔板背面的横线画1条笔直的道痕，以磷酸盐缓冲液洗涤，将此时作为起始时刻，拍照后将培养板放入培养箱内继续培养24 h后拍照。应用ImageJ软件计算细胞划痕愈合率，公式为(划痕起始宽度-划痕端点宽度)/划痕起始宽度×100%。
1.2.5 Transwell实验检测细胞侵袭能力
于Transwell小室提前铺上Matrigel基质胶。不同处理后，收集各组细胞并以1×105个/孔的密度铺在小室的上室，培养48 h，同时在下室加入含10%胎牛血清的培养液作为化学引诱物。用磷酸盐缓冲液洗涤后，向每孔中加入多聚甲醛和1%结晶紫，最后于显微镜下统计侵袭细胞数。
1.2.6 qRT-PCR
依据Trizol试剂说明书提取细胞RNA，使用微量核酸蛋白分析仪分析RNA浓度，以A260 nm与A280 nm比值(A260/A280)分析RNA纯度，RNA完整性通过将RNA样品在2%琼脂糖凝胶中电泳进行分析, miRNA反转录盒子用于RNA反转录。将SYBR Green试剂10 μL、上游引物0.6 μL、下游引物0.6 μL、模板2 μL、双蒸水6.8 μL混合后，按照95 ℃预变性2 min, 95 ℃变性30 s, 60 ℃退火30 s, 72 ℃延伸30 s, 共40个循环的反应条件，在仪器上进行qRT-PCR。以 U6 为内参，采用2-△△Ct法计算miR-1301-3p相对表达量。
1.2.7 蛋白质印迹法(Western blot)
依据RIPA裂解液说明书提取细胞蛋白，将部分蛋白样品与上样缓冲液混合均匀以100 ℃水煮12 min。使用Nanodrop2000c超微量分光光度计分析剩余一部分蛋白样品浓度。根据测定的蛋白浓度计算40 μg蛋白所需体积，随后按照40 μg蛋白的量对样品进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE), 5%脱脂牛奶封闭膜2 h, 分别加入E-cadherin(1∶ 800)、N-cadherin(1∶ 800)和GAPDH(1∶ 2 000)一抗抗体稀释液，再加入二抗稀释液(1∶ 3 000), 滴加eyoECL Plus, 暗室内曝光显影。
1.3 统计学分析
采用SPSS 21.0统计学软件分析数据，计量资料以(x±s)表示, 2组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析, P < 0.05表示差异具有统计学意义。
2. 结果
2.1 左旋含羞草碱对肺癌A549细胞增殖的影响
与对照组比较，左旋含羞草碱低剂量组、中剂量组、高剂量组的肺癌A549细胞增殖抑制率均升高，细胞克隆形成数均减少，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 1、图 1。
表 1 不同剂量左旋含羞草碱对肺癌A549细胞增殖的影响(x±s)组别 n 细胞增殖抑制率/% 细胞克隆形成数/个 对照组 3 0±0 98.39±7.12 左旋含羞草碱低剂量组 3 27.46±2.38* 77.95±6.21* 左旋含羞草碱中剂量组 3 45.82±4.42*# 61.11±5.97*# 左旋含羞草碱高剂量组 3 64.85±5.54*#△ 49.16±4.39*#△ 与对照组比较, * P < 0.05; 与左旋含羞草碱低剂量组比较, #P < 0.05;与左旋含羞草碱中剂量组比较, △P < 0.05。 2.2 左旋含羞草碱对肺癌A549细胞迁移、侵袭的影响
与对照组比较，左旋含羞草碱低剂量组、中剂量组、高剂量组的肺癌A549细胞的划痕愈合率、N-cadherin蛋白水平和侵袭细胞数均降低, E-cadherin蛋白水平均升高，差异有统计学意义(P < 0.05)。见图 2、表 2。
表 2 不同剂量左旋含羞草碱对肺癌A549细胞迁移、侵袭能力的影响(x±s)组别 n 划痕愈合率/% 侵袭细胞数/个 E-cadherin蛋白 N-cadherin蛋白 对照组 3 71.78±6.12 122.72±11.04 0.23±0.03 0.57±0.05 左旋含羞草碱低剂量组 3 55.12±4.17* 91.25±7.95* 0.38±0.03* 0.43±0.04* 左旋含羞草碱中剂量组 3 41.05±4.07*# 73.72±6.15*# 0.52±0.05*# 0.31±0.03*# 左旋含羞草碱高剂量组 3 27.55±2.62*#△ 53.57±5.01*#△ 0.68±0.05*#△ 0.19±0.02*#△ 与对照组比较, * P < 0.05; 与左旋含羞草碱低剂量组比较, #P < 0.05; 与左旋含羞草碱中剂量组比较, △P < 0.05。 2.3 miR-1301-3p在BEAS-2B细胞和肺癌A549细胞中的表达
A549细胞的miR-1301-3p表达量为(3.59±0.28), 高于BEAS-2B细胞的(1.00±0), 差异有统计学意义(P < 0.05)。
2.4 左旋含羞草碱对肺癌A549细胞miR-1301-3p表达的影响
左旋含羞草碱低剂量组、左旋含羞草碱中剂量组、左旋含羞草碱高剂量组的miR-1301-3p表达量均高于对照组，且剂量越高, miR-1301-3p表达量越低，差异有统计学意义(P < 0.05), 见表 3。
表 3 不同剂量左旋含羞草碱对肺癌A549细胞miR-1301-3p表达的影响(x±s)组别 n miR-1301-3p 对照组 3 1.00±0.00 左旋含羞草碱低剂量组 3 0.81±0.06* 左旋含羞草碱中剂量组 3 0.63±0.05*# 左旋含羞草碱高剂量组 3 0.47±0.04*#△ 与对照组比较, * P < 0.05;与左旋含羞草碱低剂量组比较, #P < 0.05;与左旋含羞草碱中剂量组比较, △P < 0.05。 2.5 下调miR-1301-3p对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭的影响
与anti-miR-NC组比较, anti-miR-1301-3p组的细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白表达升高, miR-1301-3p表达、细胞克隆形成数、侵袭细胞数、划痕愈合率和N-cadherin蛋白表达降低，差异有统计学意义(P < 0.05), 见图 3、表 4。
表 4 干扰miR-1301-3p对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭的影响(x±s)指标 anti-miR-NC组(n=3) anti-miR-1301-3p组(n=3) miR-1301-3p 1.00±0.00 0.35±0.04* 细胞增殖抑制率/% 6.24±0.45 55.33±5.12* 细胞克隆形成数/个 95.55±7.12 54.38±5.13* 划痕愈合率/% 73.11±6.41 33.51±3.26* 侵袭细胞数/个 124.04±11.35 60.53±5.34* E-cadherin蛋白 0.21±0.02 0.61±0.05* N-cadherin蛋白 0.59±0.04 0.25±0.02* 与anti-miR-NC组比较, * P < 0.05。 2.6 miR-1301-3p过表达可逆转左旋含羞草碱(400 μmol/L)对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭的作用
与左旋含羞草碱+miR-NC组相比，左旋含羞草碱+miR-1301-3p组的细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白表达降低, miR-1301-3p表达、细胞克隆形成数、侵袭细胞数、划痕愈合率和N-cadherin蛋白表达升高，差异有统计学意义(P < 0.05), 见图 4、表 5。
表 5 miR-1301-3p过表达逆转左旋含羞草碱对肺癌A549细胞的调控作用(x±s)指标 左旋含羞草碱+miR-NC组(n=3) 左旋含羞草碱+miR-1301-3p组(n=3) miR-1301-3p 1.00±0.00 2.77±0.25* 细胞增殖抑制率/% 66.27±5.62 29.12±2.81* 细胞克隆形成数/个 47.38±4.21 89.27±6.57* 划痕愈合率/% 26.45±2.59 60.63±6.12* 侵袭细胞数/个 52.13±5.13 106.63±11.63* E-cadherin蛋白 0.69±0.05 0.35±0.03* N-cadherin蛋白 0.18±0.02 0.48±0.04* 与左旋含羞草碱+miR-NC组比较, * P < 0.05。 3. 讨论
中医药具有抗炎、抗氧化应激与抗肿瘤等功效，可用于减缓肺癌发展进程，其作用机制与调控多种基因或多条信号通路表达有关[8]。miRNA可通过靶向结合靶基因而抑制其表达或翻译，进而调控肺癌细胞生物学行为，相关研究[9-10]已证实miRNA具有作为肺癌诊断及预后生物学标志物的潜力。
左旋含羞草碱可抑制人头颈鳞状细胞癌细胞增殖，并诱导细胞凋亡[11]。研究[12]报道，左旋含羞草碱可通过介导caspase-9表达而促进骨肉瘤细胞凋亡。目前，左旋含羞草碱与肺癌相关性的研究尚极少见，本研究发现左旋含羞草碱可抑制肺癌细胞增殖。上皮-间充质转化(EMT)是一种有助于癌细胞转移的进程，在此转化过程中，癌细胞能同时具有间质性和上皮性特征，另外还涉及N-cadherin表达上调和E-cadherin下调[13-14]。本研究结果显示，左旋含羞草碱能够降低肺癌细胞中N-cadherin蛋白水平和细胞侵袭能力，并增加E-cadherin表达，表明左旋含羞草碱能够抑制肺癌细胞迁移及侵袭，这可能与其能抑制EMT有关。
研究[15]显示, miR-1301-3p能促进胃癌细胞增殖和克隆形成。miR-1301-3p在非小细胞肺癌组织和细胞中表达水平升高，并可通过靶向调控Thy-1表达而促进非小细胞肺癌发展，或可作为评估患者预后的潜在生物学标志物[16]。本研究结果显示，肺癌细胞中miR-1301-3p表达量升高，而左旋含羞草碱可抑制肺癌细胞中的miR-1301-3p表达。本研究还发现，下调miR-1301-3p能够抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭，而miR-1301-3p过表达可逆转左旋含羞草碱对肺癌细胞恶性表型的抑制作用。由此提示，左旋含羞草碱可通过下调miR-1301-3p表达而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。
综上所述，左旋含羞草碱通过下调miR-1301-3p表达而抑制肺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力，或可成为治疗肺癌的新型药物。但本研究未探讨miR-1301-3p调控肺癌进程的具体机制，未来还需进一步深入研究。
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表 1 各组大鼠神经功能缺损评分比较(x±s)
分 组别 n 治疗前 治疗后 假手术组 18 0±0 0±0 模型组 18 2.45±0.20* 2.34±0.22* IGF-1组 18 2.38±0.19* 1.45±0.17*# 电针组 18 2.37±0.23* 1.53±0.16*# 电针联合LY294002组 18 2.42±0.21* 1.98±0.21*#△ 与假手术组比较, * P<0.05; 与模型组相比, #P<0.05;与电针组相比, △P<0.05。 
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表 2 各组大鼠脑组织IGF-1的含量(x±s)
组别 n IGF-1/(pg/mL) 假手术组 6 226.78±11.30 模型组 6 131.34±12.16* IGF-1组 6 195.66±15.47*# 电针组 6 182.75±13.23*# 电针联合LY294002组 6 154.06±12.75*#△ IGF-1: 胰岛素样生长因子1。
与假手术组相比, * P<0.05;与模型组相比, #P<0.05; 与电针组相比, △P<0.05。
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表 3 各组大鼠脑组织PI3K/Akt通路、自噬相关蛋白的表达(x±s)
组别 n p-PI3K/PI3K p-Akt/Akt LC3-II/LC3-Ⅰ Beclin-1 假手术组 6 0.86±0.05 0.72±0.07 0.51±0.05 0.35±0.04 模型组 6 0.43±0.04* 0.36±0.04* 1.28±0.09* 0.84±0.07* IGF-1组 6 0.75±0.07* 0.61±0.06* 0.74±0.07*# 0.53±0.05*# 电针组 6 0.72±0.05*# 0.58±0.05*# 0.80±0.06*# 0.61±0.07*# 电针联合LY294002组 6 0.54±0.06*#△ 0.43±0.06*#△ 0.96±0.09*#△ 0.73±0.06*#△ 与假手术组比较, * P<0.05; 与模型组比较, #P<0.05; 与电针组比较, △P<0.05。
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[1] GRECO P, NENCINI G, PIVA I, et al. Pathophysiology of hypoxic-ischemic encephalopathy: a review of the past and a view on the future[J]. Acta Neurol Belg, 2020, 120(2): 277-288. doi: 10.1007/s13760-020-01308-3
[2] YANG L J, ZHAO H H, CUI H. Treatment and new progress of neonatal hypoxic-ischemic brain damage[J]. Histol Histopathol, 2020, 35(9): 929-936.
[3] JANOWSKA J, GARGAS J, ZIEMKA-NALECZ M, et al. Oligodendrocyte response to pathophysiological conditions triggered by episode of perinatal hypoxia-ischemia: role of IGF-1 secretion by glial cells[J]. Mol Neurobiol, 2020, 57(10): 4250-4268. doi: 10.1007/s12035-020-02015-z
[4] JIANG L J, XU Z X, WU M F, et al. Resatorvid protects against hypoxic-ischemic brain damage in neonatal rats[J]. Neural Regen Res, 2020, 15(7): 1316-1325. doi: 10.4103/1673-5374.272615
[5] WANG X W, YUAN L J, YANG Y, et al. IGF-1 inhibits MPTP/MPP+-induced autophagy on dopaminergic neurons through the IGF-1R/PI3K-Akt-mTOR pathway and GPER[J]. Am J Physiol Endocrinol Metab, 2020, 319(4): E734-E743. doi: 10.1152/ajpendo.00071.2020
[6] 王琼芬, 王科, 王风波, 等. 智三针联合头针治疗卒中后血管性认知障碍的疗效及对VILIP-1、IGF-1水平影响[J]. 针灸临床杂志, 2020, 36(9): 5-8. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZJLC202009003.htm [7] 鲍劲松, 童光磊, 周陶成, 等. 五神针联合Bobath运动疗法治疗小儿脑性瘫痪临床疗效及对血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、胰岛素样生长因子1水平的影响[J]. 河北中医, 2020, 42(1): 106-110. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HBZY202001022.htm [8] 梁勤. 针刺治疗在新生儿缺血缺氧性脑损伤中的应用研究[J]. 中医临床研究, 2018, 10(22): 30-32. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZYLY201822013.htm [9] 徐文文, 廖庆红, 王丽芳. 电针对急性脑梗死患者脑血流动力学及血清bFGF、IGF-1的影响[J]. 上海针灸杂志, 2019, 38(9): 969-972. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-SHZJ201909005.htm [10] ZAMBERLETTI E, GABAGLIO M, PISCITELLI F, et al. Cannabidivarin completely rescues cognitive deficits and delays neurological and motor defects in male Mecp2 mutant mice[J]. J Psychopharmacol, 2019, 33(7): 894-907. doi: 10.1177/0269881119844184
[11] LIN J Y, KUO W W, BASKARAN R, et al. Swimming exercise stimulates IGF1/PI3K/Akt and AMPK/SIRT1/PGC1α survival signaling to suppress apoptosis and inflammation in aging Hippocampus[J]. Aging, 2020, 12(8): 6852-6864. doi: 10.18632/aging.103046
[12] XUE H, XU Y, WANG S, et al. Sevoflurane post-conditioning alleviates neonatal rat hypoxic-ischemic cerebral injury via Ezh2-regulated autophagy[J]. Drug Des Devel Ther, 2019, 13: 1691-1706. doi: 10.2147/DDDT.S197325
[13] LI J, AN Y, WANG J N, et al. Curcumin targets vascular endothelial growth factor via activating the PI3K/Akt signaling pathway and improves brain hypoxic-ischemic injury in neonatal rats[J]. Korean J Physiol Pharmacol, 2020, 24(5): 423-431. doi: 10.4196/kjpp.2020.24.5.423
[14] 胥虹贝, 母松, 朱艳含, 等. 电针通过PI3K/AKT信号通路动员脑缺血/再灌注大鼠骨髓内皮祖细胞至外周血[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志, 2018, 27(6): 527-533. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-GGZZ201806005.htm [15] 陈彰强, 余丹, 彭晓红, 等. 依托咪酯调控Sirt1/FOXO1通路对心肌缺血再灌注大鼠模型的保护作用[J]. 华中科技大学学报: 医学版, 2021, 50(3): 308-314. doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.2021.03.007 [16] CORTI O, BLOMGREN K, POLETTI A, et al. Autophagy in neurodegeneration: new insights underpinning therapy for neurological diseases[J]. J Neurochem, 2020, 154(4): 354-371. doi: 10.1111/jnc.15002
[17] WANG S, XUE H, XU Y, et al. Sevoflurane postconditioning inhibits autophagy through activation of the extracellular signal-regulated kinase cascade, alleviating hypoxic-ischemic brain injury in neonatal rats[J]. Neurochem Res, 2019, 44(2): 347-356. doi: 10.1007/s11064-018-2682-9
[18] WU J J, YANG Y L, GAO Y F, et al. Melatonin attenuates Anoxia/reoxygenation injury by inhibiting excessive mitophagy through the MT2/SIRT3/FoxO3a signaling pathway in H9c2 cells[J]. Drug Des Devel Ther, 2020, 14: 2047-2060. doi: 10.2147/DDDT.S248628
[19] 曲乐, 吴君燕, 袁青. 针刺对宫内窘迫导致的缺氧缺血脑损伤大鼠海马炎性反应的影响[J]. 针刺研究, 2021, 46(1): 14-20. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XCYJ202101003.htm [20] 高静, 赖名殷, 秦玮珣, 等. 针刺对宫内窘迫缺血缺氧脑损伤新生大鼠行为学及海马神经元自噬的影响[J]. 针刺研究, 2020, 45(4): 275-280, 324. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XCYJ202004005.htm [21] 黄金, 李瑞青, 吴明莉, 等. 电针神庭、百会穴对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及自噬相关蛋白表达的影响[J]. 中华中医药学刊, 2019, 37(4): 838-841, 1041. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZYHS201904015.htm [22] 孙晓伟, 刘婷婷, 孙忠人, 等. 电针对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞自噬影响的实验研究[J]. 针灸临床杂志, 2019, 35(1): 58-63, 89. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZJLC201901016.htm [23] 黄倩茹, 萨喆燕, 潘晓华, 等. 电针长强穴对缺血缺氧脑损伤大鼠发育的影响[J]. 云南中医学院学报, 2018, 41(1): 25-28. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YNZY201801006.htm [24] UMRAN R M, AL-TAHIR M, JAGDISH D, et al. Insulin-like growth factor-1 levels in term newborns with hypoxic-ischemic encephalopathy[J]. Am J Perinatol, 2016, 33(7): 640-645.
[25] VAES J E G, KOSMEIJER C M, KAAL M, et al. Regenerative therapies to restore interneuron disturbances in experimental models of encephalopathy of prematurity[J]. Int J Mol Sci, 2020, 22(1): E211.
[26] HELLSTRÖM A, LEY D, HANSEN-PUPP I, et al. Role of insulinlike growth factor 1 in fetal development and in the early postnatal life of premature infants[J]. Am J Perinatol, 2016, 33(11): 1067-1071.
[27] ZHAO B, ZHENG Z B. Insulin growth factor 1 protects neural stem cells against apoptosis induced by hypoxia through Akt/mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase (Akt/MAPK/ERK) pathway in hypoxia-ishchemic encephalopathy[J]. Med Sci Monit, 2017, 23: 1872-1879.
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