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rhuPAa-melittin发酵条件及大规模纯化方法

金世光, 李城, 王大新, 颜炜群

金世光, 李城, 王大新, 颜炜群. rhuPAa-melittin发酵条件及大规模纯化方法[J]. 实用临床医药杂志, 2013, (16): 27-30. DOI: 10.7619/jcmp.201316010
引用本文: 金世光, 李城, 王大新, 颜炜群. rhuPAa-melittin发酵条件及大规模纯化方法[J]. 实用临床医药杂志, 2013, (16): 27-30. DOI: 10.7619/jcmp.201316010
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JIN Shiguang, LI Cheng, WANG Daxin, YAN Weiqun. Optimization of rhuPAa-melittin fermentation and purification conditions on large scale[J]. Journal of Clinical Medicine in Practice, 2013, (16): 27-30. DOI: 10.7619/jcmp.201316010
Citation: JIN Shiguang, LI Cheng, WANG Daxin, YAN Weiqun. Optimization of rhuPAa-melittin fermentation and purification conditions on large scale[J]. Journal of Clinical Medicine in Practice, 2013, (16): 27-30. DOI: 10.7619/jcmp.201316010
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rhuPAa-melittin发酵条件及大规模纯化方法

  • 扬州大学临床医学院医学实验研究中心,江苏扬州,225001

基金项目: 江苏省十二五"科教兴卫工程"创新团队与领军人才，江苏省科技支撑计划社会发展项目，国家973重点项目
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  • 中图分类号: R378

Optimization of rhuPAa-melittin fermentation and purification conditions on large scale

摘要

    摘要
  • 摘要: 目的 通过rhuPAa-melittin在80 L发酵罐中的发酵表达,优化发酵条件及改进适合大规模纯化的方法,获得纯化的目的蛋白.方法 采用实验制备的rhuPAa-melittin重组质粒,通过电转化法将rhuPAa-melittin-pPICZαC载体转入毕赤酵母(Pichia pastoris)中,用PCR法扩增和检测rhuPAa-melittin基因在毕赤酵母基因组中的整合.利用毕赤酵母进行小量发酵,摸索最佳表达时间、pH及最佳的纯化方法.通过rhuPAa-melittin在80 L发酵罐中的发酵表达,优化发酵条件及改进适合大规模纯化的方法.结果 rhuPAa-melittin发酵条件在温度为28℃～30℃,FM21培养基中添加0.5％的蛋白胨,甲醇最终的流加速度控制在9 mL/(h.L),初始发酵液体积、DO值(溶解氧)在25％～ 30％,发酵时间为12h,pH在6.0～7.0时获得高产量、高纯度、高收率的蛋白.结论 获得产量约350 mg/L,纯度可达96％以上,收率可达65％左右的rhuPAa-melittin蛋白.
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    • 参考文献(13)
  • 王建英. HLA-G、HLA-E在卵巢恶性肿瘤免疫逃逸中的作用及药物干预的实验研究 [D]. 石家庄:河北医科大学, 2006.
    Liotta L A. Cancer cell invasion and metastasis [J]. Scientific American Magazine, 1992(2):54.
    Fury M G, Zahalsky A, Wong R. A PHase Ⅱ study of SU5416 in patients with advanced or recurrent head and neck cancers [J]. Investigational New Drugs, 2007(2):165.
    Dorrell M I, Aguilar E, Scheppke L. Combination angiostatic therapy completely inhibits ocular and tumor angiogenesis [J]. Proceedings of the National Academy of Sciences(USA), 2007(3):967.
    He C, He P, Liu L P. Analysis of expressions of components in the plasminogen activa-tor system in high-and lowmetastatic human lung cancer cells [J]. Journal of Cancer Research and Clinical Oncology, 2001(3):180.
    Bolon I, Devouassoux M, Robert C. Expression of urokinase-type plasminogen activ-ator, stromelysin 1, stromelysin 3, and matrilysin genes in lung carcinomas [J]. American Journal of Pathology, 1997(5):1619.
    Robert C, Bolon I, Gazzeri S. Expression of plasminogen activator inhibitors 1 and2in lung cancer and their role in tumor progression [J]. Clinical Cancer Research, 1999(8):2094.
    许天敏. rhuPAa-melittin在毕赤酵母中的表达及其对卵巢癌靶向治疗的研究 [D]. 长春:吉林大学, 2007.
    Hockney RC. Recent developments in heterologous protein production in Escherichia coli [J]. Trends in Biotechnology, 1994, (11):456.
    Bruel C, Cha K, Reeves P J. Rhodopsin kinase:expression in mammalian cells and a two-step purification [J]. Proceedings of the National Academy of Sciences(USA), 2000(7):3004.
    Cereghino J L, Cregg J M. Heterologous protein expression in the methylotroPHic yeast Pichia pastoris [J]. FEMS Microbiology Reviews, 2000(1):45.
    夏姗, 武福军, 赵洪亮. 毕赤酵母工程菌高密度发酵的研究进展 [J]. 生物技术通讯, 2013(1):109.
    李莲年, 董秀涛, 王丽丽. 毕赤酵母生孢诱导条件的优化研究 [J]. 微生物学杂志, 2013(1):30.
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  • 期刊类型引用(25)

    1. 张磊，王宏，张小伟，孟位明，赵志江. 跗骨窦小切口与经外侧“L”形切口术对跟骨骨折患者的疗效. 河北医药. 2024(15): 2295-2299 . 百度学术
    2. 李德隆，孙贵耀，曹雨，郑辉，于海峰，李少刚，乔晓光. 接骨七厘胶囊联合跗骨窦切口入路钢板内固定术治疗跟骨骨折的效果. 中外医学研究. 2023(09): 16-19 . 百度学术
    3. 廖文辉. 跗骨窦入路微创内固定治疗糖尿病跟骨骨折的临床效果. 中外医疗. 2023(06): 60-63+68 . 百度学术
    4. 窦伟誉，罗鹰，袁淑. 不同内固定方式对跟骨骨折患者骨折复位指标的影响及安全性分析. 中国医学创新. 2023(18): 70-74 . 百度学术
    5. 孙腾飞. 跟骨骨折跗骨窦切口微创入路与传统扩大L切口入路切开复位内固定术效果对比研究. 河南外科学杂志. 2023(05): 136-139 . 百度学术
    6. 谭广兴. 两种不同内固定方案治疗跟骨骨折的效果对比. 中国现代药物应用. 2022(01): 56-58 . 百度学术
    7. 李英慧，李春洪，马俊. 微创跗骨窦切口治疗跟骨骨折的临床效果探讨. 系统医学. 2022(03): 155-158 . 百度学术
    8. 席银刚. 跟骨骨折患者内固定术后发生内翻畸形的影响因素. 中国民康医学. 2022(11): 18-20 . 百度学术
    9. 刘美珍. 穴位贴敷与循经按摩护理对跟骨骨折术后患者的影响研究. 中国中医药现代远程教育. 2022(14): 156-158 . 百度学术
    10. 李钟，刘立云，邬春讯，陈礼苹. 跗骨窦入路微创内固定术治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折效果观察. 青岛医药卫生. 2022(04): 245-249 . 百度学术
    11. 范若焱. 经跗骨窦小切口入路在跟骨骨折患者钢板内固定术中的疗效分析. 现代诊断与治疗. 2022(10): 1503-1505 . 百度学术
    12. 马胡晶，朱康，王晓桐，尹金旺，鲍启忠，邢桂武，曲晓勇. 跗骨窦入路空心钉内固定术与外侧扩大型切口钢板内固定术治疗Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折的效果. 中国医学创新. 2022(25): 68-72 . 百度学术
    13. 左强. 跗骨窦入路内固定治疗跟骨骨折患者的研究进展. 医疗装备. 2021(06): 189-190 . 百度学术
    14. 牟遐平，戢勇，罗德军，张兆尧，朱庆茂. 经跗骨窦入路微创治疗跟骨骨折畸形愈合. 中国现代医生. 2021(09): 106-109 . 百度学术
    15. 季鹏飞. 跗骨窦入路空心钉固定术治疗SandersⅡ型跟骨骨折分析. 中国医疗器械信息. 2021(12): 7-8+16 . 百度学术
    16. 陈封明，焦锋，费奉龙，唐东鸣. 经微创跗骨窦切口治疗跟骨骨折的疗效. 中国卫生标准管理. 2021(16): 20-23 . 百度学术
    17. 杨卫保，梁旺全. 关节镜引导行微创钢板内固定术治疗跟骨骨折患者的临床效果. 国际医药卫生导报. 2021(19): 3047-3050 . 百度学术
    18. 闫宏林，王瑞麟，吝鹏波，雷永林. 微型切口锁定钢板内固定术对SandersⅡ型跟骨骨折患者术后疼痛程度及AOFAS评分的影响. 临床医学研究与实践. 2020(15): 56-58 . 百度学术
    19. 杨顺，李天喜，王文峰. 微创钢板内固定术治疗跟骨骨折患者的临床观察. 现代诊断与治疗. 2020(04): 619-620 . 百度学术
    20. 曾瑜瑜，张庆林，邓柱洪，邓照辉. 经跗骨窦入路微型锁定钢板联合空心钉治疗Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折的效果分析. 中国医学创新. 2020(17): 52-55 . 百度学术
    21. 孙广宏. 经跗骨窦入路与经外侧入路术式治疗跟骨骨折患者的效果比较. 中国民康医学. 2020(12): 123-125 . 百度学术
    22. 周锦明，于鹤，关盛溢. 跗骨窦专用钢板内固定在跟骨后关节面塌陷型骨折中的应用. 实用临床医药杂志. 2020(16): 77-81 . 本站查看
    23. 陈杰. 跗骨窦小切口入路钢板内固定术对跟骨骨折患者Bohler、Gissane角及足功能的影响. 实用中西医结合临床. 2020(12): 79-80 . 百度学术
    24. 李文韬，李宏伟. 两种不同内固定方案治疗跟骨骨折的效果对比. 中国继续医学教育. 2020(33): 80-83 . 百度学术
    25. 鲍亮，赵晨，刘琮，朱鹏，周涛，张兵. 经跗骨窦切口与经外侧L型切口治疗跟骨骨折的疗效研究. 中华生物医学工程杂志. 2020(05): 429-433 . 百度学术

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