人Hiwi miRNA干扰质粒的构建及其鉴定

郝波; 蒋建霞; 施瑞华; 张国新; 成道祥

doi:10.7619/jcmp.201303001

人Hiwi miRNA干扰质粒的构建及其鉴定

1.
南京医科大学第一附属医院消化科,江苏南京,210029;
2.
江苏省陆军预备役高射炮兵第一师第一团,江苏南京,210029

基金项目: 国家自然基金项目，江苏省南京市科技发展研究项目资助

详细信息

中图分类号: R735.7
计量
- 文章访问数: 271
- HTML全文浏览量: 29
- PDF下载量: 11
出版历程
- 发布日期: 2013-05-22

Construction and identification of miRNA recombinant eukaryotic expression vectors of Hiwi

摘要

摘要: 目的构建人Hiwi基因miRNA干扰质粒,探讨其对肝癌7721细胞株中Hiwi基因和蛋白表达的阻抑作用.方法根据Homo sapiens Hiwi基因序列,设计RNA干扰靶点,构建4对Hiwi的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA及1对无效对照miRNA干扰质粒并将其转染至肝癌7721细胞中,通过RT-PCR和Western blot检测7721细胞中Hiwi mRNA和蛋白的表达水平.结果成功构建了4对Hiwi miRNA干扰质粒及无效干扰质粒,测序表明Hiwi干扰序列及读框完全正确.RT-PCR和Western blot结果显示,与未转染组及阴性对照组比较,转染该载体能有效下调7721细胞株中mRNA和蛋白的表达.结论成功构建了Hiwi的干扰表达载体,为进一步探讨Hiwi基因在肝癌中的相关机制提供了实验基础.
- Hiwi基因 /
- miRNA干扰 /
- 真核表达质粒 /
- 肝癌

HTML全文

参考文献(11)

Lin H, Spradling A C. A novel group of pumilio mutations affects the asymmetric division of germline stem cells in the Drosophila ovary [J]. Development, 1997.2463.

JiangJ, Zhang H, Tang Q. Expression of HIWI inhuman hepatocellular carcinoma [J]. Cell Biochemistry and Biophysics, 2011(1):53.

Denli A M, Tops B B, Plasterk R H. Processing of primary microRNAs by the Microprocessor complex [J]. Nature, 2004, (7014):231.

Gregory R I, Yan K P, Amuthan G. The Microprocessor complex mediates the genesis of microRNAs [J]. Nature, 2004, (7014):235.

Sayed D, Abdellatif M. MicroRNAs in Development and Disease [J]. Physiological Reviews, 2011(3):827.

Sun G, Wang Y, Sun L. Clinical significance of Hiwi gene expression in gliomas [J]. Brain Research, 2011.183.

HeW, Wang Z, Wang Q. Expression of HIWI in human esophageal squarmous cell carcinoma is significantly associated with poorer prognosis [J]. BMC Cancer, 2009.426.

Grochola L F, Greither T, Taubert H. The stem cellassociated Hiwi gene in human adenocarcinoma of the pancreas:expression and risk of tumour-related death [J]. British Journal of Cancer, 2008.1083.

陈岐辉, 卢绩, 许建成. Hiwi基因在膀胱移行细胞癌组织切片中的表达 [J]. 中国实验诊断学, 2009(9):1168.doi: 10.3969/j.issn.1007-4287.2009.09.014.

Taubert H, Greither T, Kaushal D. Expression of the stem cell self-renewal gene Hiwi and risk of tumour-related death in patients with soft-tissue sarcoma [J]. Oncogene, 2007.1098.

Li S, Meng L, Zhu C. The universal over expression of a cancer testis antigen Hiwi is associated with cancer angiogenesis [J]. Oncology Reports, 2010(4):1063.

施引文献(6)

期刊类型引用(5)

1.	华优发，林钰明，朱侣明. DWI、ADC值对骨肌系统良恶性病变的鉴别诊断价值. 医学信息. 2024(23): 163-166 . 百度学术
2.	张小玲. 超声弹性成像对浅表器官及软组织肿块诊断效能观察. 现代医用影像学. 2023(02): 338-341 . 百度学术
3.	劳诚臣，覃东琼，黄煜，韦姣，韦凤仙，余媛媛. MSKUS检查对于脑梗后肩周软组织损伤的诊治价值. 影像科学与光化学. 2022(01): 198-202 . 百度学术
4.	李滔. 肌骨超声用于创伤性浅表软组织损伤中效果探讨. 影像研究与医学应用. 2021(07): 119-120 . 百度学术
5.	贾贺. 骨与软组织肿瘤术前穿刺活检准确率相关因素分析. 实用医技杂志. 2021(10): 1248-1250+1279 . 百度学术

其他类型引用(1)

资源附件(0)

计量

文章访问数: 271
HTML全文浏览量: 29
PDF下载量: 11
被引次数: 6

人Hiwi miRNA干扰质粒的构建及其鉴定

计量

出版历程

Construction and identification of miRNA recombinant eukaryotic expression vectors of Hiwi

期刊类型引用(5)

其他类型引用(1)

计量

出版历程

目录